Le canal PLT-F disponible sur les analyseurs XR-Series et XN-Series a été conçue comme un canal de mesure dédié pour fournir des numérations plaquettaires exactes et précises dans les analyses hématologiques de routine - même avec des échantillons présentant une thrombopénie sévère ou autrement problématiques, tels que les interférences. Une combinaison de réactifs a été spécialement conçue à cet effet.

Le fluorochrome marque spécifiquement les plaquettes et aucune autre cellule sanguine. Ceci minimise les interférences et est la raison principale de la très bonne corrélation avec la méthode de cytométrie en flux CD41/CD61*. Une autre raison est la grande précision de la mesure en cas de faibles concentrations puisque le canal PLT-F analyse un volume cinq fois supérieur de l'échantillon aspiré par rapport à la mesure standard de détection DC (impédance).

L'analyse PLT-F permet une quantification rapide et entièrement automatisée de la fraction plaquettaire immature (IPF et IPF#). Les paramètres IPF permettent un diagnostic différentiel rapide et efficace de la thrombopénie puisqu'ils peuvent être utilisés par les cliniciens comme une première orientation pour déterminer si la cause possible est d’origine centrale ou périphérique*.

Avec les échantillons sévèrement thrombopéniques et ceux présentant un message d'action concernant un résultat plaquettaire non fiable mesuré par détection DC, les ensembles de règles des XN et XR-Series déclenchent automatiquement une analayse PLT-F en tant que test réflexe. Cela permet de s'assurer que seuls les échantillons nécessitant ce test réflexe sont mesurés dans le canal PLT-F, garantissant ainsi un fonctionnement efficace et économique du canal PLT-F.

Pour les patients souffrant d'une thrombopénie incertaine, l'option TWO (Thrombopoiesis Workflow Optimisation) de l'Extended IPU déclenche une analyse PLT-F afin de rendre disponible le paramètre IPF dont l'information peut être cliniquement pertinente. Cette décision automatique permet de standardiser et de rationaliser l'ensemble du workflow plaquettaire, sur la base d'un ensemble de règles entièrement personnalisables.

L'analyse PLT en fluorocytométrie en flux

Les membranes des plaquettes sont perforées par le réactif de lyse, mais les cellules restent globalement intactes pendant ce processus. Par la suite, le fluorochrome marque spécifiquement l'ARN à l'intérieur des plaquettes, en évitant les interférences avec d'autres cellules ou fragments de taille similaire. Ceci est dû au marquage des organites cellulaires riches en acides nucléiques, tels que les mitochondries et le réticulum endoplasmique, plutôt que des membranes cellulaires.

En utilisant la lumière diffusée vers l'avant reflétant la taille et le signal de fluorescence reflétant le contenu en acides nucléiques marqués, les plaquettes sont séparées des globules rouges et des globules blancs et sont projetées en conséquence sur le scattergramme PLT-F.

Le canal PLT-F permet également la quantification rapide et entièrement automatisée de la fraction plaquettaire immature (IPF et IPF#). Les plaquettes immatures peuvent être séparées des plaquettes matures car elles contiennent plus d'ARN que les plaquettes matures, ce qui se traduit par une augmentation des signaux de fluorescence. Comme elles sont aussi légèrement plus grandes, leur signal de diffusion vers l'avant est également plus fort que celui des plaquettes matures.

La figure ci-dessous montre le scattergramme PLT-F standard avec une distribution cellulaire normale.

Loading 3D-Element

XR-Series utilise des signaux provenant de la diffusion de la lumière laser à deux angles (FSC et SSC) et des signaux de fluorescence (SFL). Chaque cellule sanguine détectée possède ses propres valeurs de coordonnées x, y et z représentant respectivement le signal FSC, SSC et SFL. Grâce à des algorithmes avancés, XR-Series est capable d'identifier et de regrouper les types cellulaires, en particulier les cellules anormales, en fonction de leur taille, de leur complexité interne et de leur contenu en ADN/ARN. Le résultat de cette analyse se reflète sur les scattergrammes 3D, qui peuvent pivoter dans toutes les directions pour examiner les populations de cellules sous différents angles.

Bénéfices pour les laboratoires et les cliniciens

En cas d'anomalies et de faibles numérations, une numération plaquettaire précise et exacte devient un défi. Le canal PLT-F et le concept de gestion des plaquettes garantissent la fiabilité des rendus de résultats au laboratoire, tout en rationalisant l'ensemble du flux de travail des plaquettes et en réduisant les délais d'exécution. Il n'est plus nécessaire de compter les plaquettes manuellement ou à l'aide de technologies et d'appareils distincts, ce qui était chronophage.

Pour les échantillons dont la numération est inexacte en raison d'anomalies ou dont la numération plaquettaire est très faible, l'analyseur XR-Series ou XN-Series effectue automatiquement une mesure réflexe dans le canal de mesure plaquettaire dédié (PLT-F).
L'analyse PLT-F résout la plupart des interférences présentes avec la détection DC puisque le marqueur fluorescent marque spécifiquement les plaquettes - il n'y a donc pas d'interférence même en présence de globules rouges fragmentés. Les numérations faussement basses dues à des plaquettes géantes ne se produisent plus avec l'analyse PLT-F, et les amas plaquettaires sont détectés sur le canal PLT-F et signalés par l'analyseur.
La technologie de fluorescence et le volume de comptage 5 fois plus élevé permettent également une grande précision quant aux seuils de transfusion plaquettaire, ce qui facilite la prise de décisions cliniques*.
Les résultats sont directement comparables à la méthode de référence de cytométrie en flux CD41/CD61. Dans de nombreuses publications de recherche scientifique, la numération PLT-F s'est avérée hautement corrélée à cette méthode*.
La fraction plaquettaire immature (IPF) soutient le diagnostic différentiel de la thrombopénie*.
Les volumes d'aspiration en mode sang total ne sont que de 88 μL, et le profil PLT-F peut même être analysé en mode pré-dilué, ce qui est particulièrement avantageux lors de la mesure de l’IPF à partir d'un échantillon de sang de nouveau-né pour soutenir le diagnostic différentiel de la thrombopénie néonatale.
La numération plaquettaire immature IPF# dénombre les plaquettes les plus récemment produites dans la moelle osseuse*.
L'option TWO intégrée à l’Extended IPU permet de surveiller les patients thrombopéniques et d'optimiser les déclenchements du canal PLT-F afin de garantir des résultats plaquettaires comparables tout au long de la période de suivi.

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